产品基本信息
- KX0210041
- QuickAntibody-Mouse5W(5周标准鼠单抗/多抗制备佐剂)
- 免疫佐剂
- 常温运输,2-8ºC 保存,无菌取用,有效期 18 个月。(切勿冻存!)
产品详情
QuickAntibody 系列免疫佐剂包括四种具有自主知识产权、独特配方的新型水溶性免疫佐剂,分别用于制备小鼠单克隆/多克隆抗体以及兔多克隆抗体(见下表)。与常规弗氏佐剂相比,具有免疫针次少、抗原用量低、抗体产生快、抗体滴度高、抗体亲合力高、不破坏抗原天然构象和使用方便等多方面优点。
产品名称 | 货号 | 免疫周期 | 特点 | 用途 | 预期滴度 |
KX0210041 | 5周 | 标准免疫 | 小鼠单抗/多抗 | 1:10000-1:10000000 | |
KX0210042 | 3周 | 快速免疫 | 小鼠多抗/单抗 | 1:10000-1:100000 | |
KX0210043 | 2周 | 快速免疫 | 小鼠多抗 | 1:1000-1:10000 | |
KX0210045 | 8周 | 标准免疫 | 兔多抗 | 1:10000-1:1000000 |
QuickAntibody-Mouse5W用途
通过5周2针的标准免疫程序制备小鼠单克隆和多克隆抗体,ELISA滴度(Cutoff值为0.1000)可达到1:10000-1:10000000。
QuickAntibody-Mouse5W使用方法(详见使用说明书)
1. 用生理盐水将抗原稀释到2倍最终浓度(按每针次50μl用量配制)。
备注:推荐使用的抗原用量为
(1)免疫原性较强的灭活全病毒或全细菌以及病毒样颗粒抗原每针次1-5μg;
(2)免疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-20μg;
(3)偶联了载体蛋白的小分子抗原每针次20-50μg。
2. 充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需用量(按每针次50μl)与抗原按体积比1:1迅速混匀。
备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与抗原混合操作越快越好。
3. 通过后腿小腿肌肉注射免疫小鼠(视频),每只小鼠注射100μl。
备注:本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注射。
4. 第21天按同样方式加强免疫1针。
备注:每次佐剂和抗原现配现用。
5. 第35天采微量尾血进行ELISA测定,抗体滴度应在1:10000-1:10000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免疫和脾细胞融合。
注意事项
1. 常温运输,4°C保存,禁止冻存,冻存会对佐剂的使用效果产生影响。2. 佐剂中会含有沉淀,沉淀是佐剂的有效成分,在使用时请务必注意混匀。混匀的参考方式有两种:①上下摇匀;②用枪头吹打混匀。3. 请注意现混现用,佐剂与抗原拿到动物房去混匀,混匀完成后,10min内免疫到动物体内。时间不要间隔太长,佐剂内含有沉淀,时间太长会造成沉淀下沉,从而造成有效成分分布不均,对免疫结果带来影响。
常见问题
如何选择QuickAntibody系列免疫佐剂?
我们水溶性的QuickAntibody系列的免疫佐剂分为:小鼠5周免疫佐剂、小鼠3周免疫佐剂、小鼠2周免疫佐剂和兔8周免疫佐剂,共计四种。
小鼠5周佐剂拥有最好的抗体亲和力与抗体效价,因此制备单克隆抗体,我们一般建议使用小鼠5周免疫佐剂;制备小鼠多克隆抗体,我们一般建议使用小鼠3周免疫佐剂。如果赶时间或对抗体质量要求不高,可以使用小鼠3周免疫佐剂制备小鼠单抗,可以使用小鼠2周免疫佐剂制备小鼠多抗。
QuickAntibody系列免疫佐剂有哪些特点?
与常规使用的弗氏佐剂相比,QuickAntibody免疫佐剂具有免疫周期短、针次少、无需乳化、抗原用量低、抗体滴度高、抗体亲合力高、易获得构象型表位的抗体等多方面优点,详述如下:
1. QuickAntibody只需两针免疫,无论是用于单克隆还是多克隆抗体制备,与弗氏佐剂相比可减少免疫针次。
2. QuickAntibody通过减少免疫针次和降低每针次抗原用量,从而可大大节省总抗原用量。推荐使用的抗原用量为(1)免疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-50μg(通常为小鼠5-20μg,兔子20-50μg);(2)免疫原性较强的灭活全病毒或全细菌以及病毒样颗粒抗原每针次1-10μg(通常为小鼠1-5μg ,兔子5-10μg)。
3. QuickAntibody抗体产生快,抗体滴度高,抗体亲合力高。以标准免疫程序为例,无论是用于单克隆还是多克隆抗体制备,只需要在三周内进行两针免疫,通常在第五周即可获得ELISA滴度(Cutoff值为0.1000)高达1:10000-1:10000000的高亲合力抗体水平。
4. QuickAntibody不破坏抗原天然构象,从而易于筛选获得针对构象型抗原表位的单克隆抗体,这是弗氏佐剂所不具备的一个重要特点。
5. QuickAntibody是水溶性佐剂,使用时不需要弗氏佐剂的复杂乳化过程,抗原和佐剂只需简单混合即可免疫动物。
6. QuickAntibody使用肌肉免疫途径,与常规小鼠单克隆抗体制备过程中使用足垫或脾内免疫相比,极大方便了使用。
7. QuickAntibody的一个重要用途是可方便地用于制备小鼠多克隆抗体。常规多克隆抗体制备多使用兔子,不但免疫针次多、抗原用量大和抗体产生慢,而且由于技术要求较高而往往需要委托专门单位制备。使用QuickAntibody免疫佐剂,任何实验动物人员均可方便快速地制备小鼠多克隆抗体,标准免疫程序只需要简单地免疫5只小鼠,即可在五周后获得1ml高质量的小鼠多克隆抗体。(强烈推荐使用本佐剂制备小鼠多克隆抗体,1ml高质量的小鼠多克隆抗体足以满足绝大多数用户的实验需求,包括用于酶联免疫、免疫印迹、流式细胞、免疫组化和免疫沉淀等)。
佐剂适用物种
QuickAntibody系列佐剂已被广泛应用于:小鼠、大鼠、兔子、豚鼠、山羊、羊驼、鸡、猴子等多种物种免疫,效果良好。
物种 | 佐剂类型 | 抗原用量ug | 抗原体积ul | 佐剂体积ul |
小鼠 | QuickAntibody-Mouse | 5~40ug | 50 | 50 |
大鼠、豚鼠 | QuickAntibody-Mouse | 20~50ug | 70 | 70 |
兔子、鸡 | QuickAntibody-Rabbit | 50~100ug | 100 | 100 |
山羊、羊驼 | QuickAntibody-Rabbit | 200~500ug | 300~500 | 300~500 |
猴子 | QuickAntibody-Rabbit | 200ug | 200~300 | 200~300 |